Daghang mga enzyme nga sagad gigamit sa mga eksperimento sa PCR

Polymerase chain reaction, gipamubo ngaPCRsa English, maoy usa ka molecular biology nga teknik nga gigamit sa pagpadako sa piho nga mga tipik sa DNA.Mahimo kining isipon nga usa ka espesyal nga replikasyon sa DNA sa gawas sa lawas, nga makadugang pag-ayo sa gamay kaayo nga gidaghanon sa DNA.Atol sa tibuokPCRproseso sa reaksyon, ang usa ka klase sa mga sangkap adunay hinungdanon nga papel - mga enzyme.

1. Taq DNA

Sa mga eksperimento sa unang mga adlaw saPCR, gigamit sa mga siyentista ang Escherichia coli DNA polymerase I, Apan adunay problema niini nga enzyme: kini kinahanglan nga pun-on ang bag-ong enzyme sa matag higayon nga ang usa ka siklo gihimo, nga naghimo sa mga lakang sa operasyon nga medyo komplikado ug kini lisud nga bug-os nga awtomatikong mapadako.Nasulbad kini nga problema human aksidenteng nalain sa mga siyentipiko ang Taq DNA polymerase gikan sa Thermus aquaticus niadtong 1988. Sukad niadto, ang awtomatikong pagpadako sa DNA nahimong tinuod.Ang pagkadiskobre niini nga enzyme naghimo usabPCRteknolohiya usa ka kombenyente, praktikal ug unibersal nga teknolohiya.Sa pagkakaron, ang Taq DNA polymerase mao ang labing komon nga polymerase sa DNA kits.

2. PfuDNA

Sama sa gihisgutan sa ibabaw, ang Taq DNase adunay usa ka dako nga bug, mao nga ang mga siyentista nag-usab sa Taq DNA polymerase sa usa ka sukod aron malikayan ang dili piho nga pagpadako tungod sa mismatching, nga miresulta sa dili tukma nga mga resulta sa pagsulay.Apan ang pagbag-o sa Taq DNA polymerase mahimong makapugong sa kalihokan sa DNA polymerase sa temperatura sa kwarto.Ang PfuDNA polymerase mahimo’g maayo ang paghimo sa mga kakulangan sa Taq DNA polymerase, aron ang reaksyon sa PCR mahimo nga normal, ug ang rate sa kalampusan sa pagpadako sa target nga gene mahimong epektibo nga mapauswag.

3. Reverse Transcriptase

Ang reverse transcriptase nadiskobrehan niadtong 1970. Kini nga enzyme naggamit sa RNA isip template, dNTP isip substrate, nagsunod sa prinsipyo sa base pairing, ug nag-synthesize sa usa ka DNA single strand nga komplementaryo sa RNA template sa 5′-3′ nga direksyon.Ang reverse transcriptase nag-una nagsalig sa DNA polymerase nga kalihokan gikan sa DNA o RNA templates ug busa walay 3′-5′ exonuclease nga kalihokan.Bisan pa, kini adunay kalihokan sa RNase H, nga naglimite sa gitas-on sa synthesis sa reverse transcriptase sa usa ka sukod.Tungod sa ubos nga pagkamatinud-anon ug thermostability sa wild reverse transcriptase, giusab usab kini sa mga siyentipiko.

KayPCReksperimento, ang mga nag-unang consumables mao ang: indibidwal nga PCR tube, 4/8-strip PCR tube, PCR palid.

ni LabioMga gamit sa PCRadunay mosunodbentaha:

Mga plato sa PCR: Lapad nga thermal cycler compatibility;Taas nga kalainan, dali nga pag-ila sa maayo;maayo fluorescence pagpamalandong;maayopagbalhin sa kainit;Sertipikado nga DNase, RNase, DNA, PCR inhibitors, ug gisulayan nga walay pyrogen.

Indibidwal nga mga tubo sa PCR: Evaporation-resistant; maayopagbalhin sa kainit;maayo kaayo nga optical nga katin-aw; Certified DNase, RNase, DNA, PCR inhibitors, ug gisulayan nga walay pyrogen.

4/8-strips nga PCR tubes: Ang ultra-nipis nga mga dingding; taas nga katin-aw; maayo nga pagpamalandong sa fluorescence;mahimong magamit sa industriya sa parmasyutiko, industriya sa pagkaon, ug biology sa molekula; taas nga kalidad, birhen nga materyal sa PP; Sertipikado nga DNase, RNase, DNA, PCR inhibitor, ug gisulayan nga wala’y pyrogen.